蘇木精-伊紅染色法 ( Hematoxylin-Eosin staining )，簡(jiǎn)稱HE染色法 ，切片技術(shù)里常用的染色法之一  。

蘇木精染液為堿性 ，主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色；伊紅為酸性染料，主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色 。

以心臟HE染色為例子，小鼠取材后，將心臟置于預(yù)冷的PBS中沖洗干凈，用干凈的濾紙吸干水分后，置于4%多聚甲醛內(nèi)固定24h以上，之后通過(guò)梯度脫水（機(jī)器脫水步驟）：70%乙醇溶液30min--80%乙醇溶液30min--90%乙醇溶液30min--95%乙醇溶液30min--無(wú)水乙醇60min--無(wú)水乙醇60min----二甲苯60min--二甲苯60min----石蠟60min--石蠟60min--石蠟60min
脫水結(jié)束后，對(duì)心臟組織進(jìn)行石蠟包埋。（鐵皮盒進(jìn)行包埋，按照自己要切的位置進(jìn)行一個(gè)包埋）

切片，切片機(jī)切成5um厚度的組織，可提前將組織塊放入冰水混合物中浸泡一會(huì)兒，這樣切出來(lái)的組織不會(huì)有裂痕，每張黏附載玻片上3~4個(gè)組織即可。
之后就可以開始準(zhǔn)備后續(xù)的染色啦

1脫蠟

二甲苯10min--二甲苯10min--無(wú)水乙醇5min--無(wú)水乙醇5min--95%乙醇5min--85%乙醇5min--70%乙醇5min----純水5min

二甲苯的作用：脫去切片中的石蠟，起透明作用，使切片更容易觀察，使后面步驟染液充分進(jìn)入組織中

乙醇的作用：洗脫二甲苯，使水進(jìn)入組織中，充分水化。

2.染色 （針對(duì)不同的組織、器官，染色時(shí)間需要自己摸索）

蘇木素4min--自來(lái)水沖洗10min--鹽酸乙醇分化3s--自來(lái)水沖洗10min（返藍(lán)）--伊紅25s~1min
鹽酸乙醇的作用：使細(xì)胞核中結(jié)合過(guò)多的染液和細(xì)胞漿中多余的染液被除去。

3.脫水

無(wú)水乙醇5min--無(wú)水乙醇5min--無(wú)水乙醇5min

4.透化

二甲苯10min--二甲苯10min--二甲苯10min

5.封片

中性樹脂封片后待其自然晾干即可置于顯微鏡下拍照觀察。

注意：蘇木素染過(guò)可用鹽酸分化使顏色變淡；伊紅過(guò)染可用70%乙醇洗使顏色變淡。

片子不可在空氣中長(zhǎng)時(shí)間暴露，會(huì)變黑，因此從二甲苯取出直接封片，不然會(huì)影響后面的拍照觀察

文章出自：蘇木精-伊紅染色實(shí)驗(yàn)      想了解更多請(qǐng)關(guān)注：http://www.dogcareservices.net/